Технология CRISPR/Cas9 разрабатывается многими исследовательскими группами, поэтому, в отличие от открытия структуры ДНК, не имеет авторства. Можно назвать имена пятерых ученых, наиболее отличившихся при изучении CRISPR/Cas9 и создавших на ее основе передовую технологию редактирования генов и геномов про- и эукариотических организмов. Это Эммануэль Шарпентье (E. Charpentier) из Института инфекционной биологии Макса Планка (Германия), Дженнифер Дудна (J. Doudna) из Калифорнийского университета в Беркли (США), Лучиано Марраффини (L. Marraffini) из Рокфеллеровского университета (США), Франциско Моджика (F.J.M. Mojica) из Университета Аликанте (Испания), Фэн Чжан (F. Zhang) из Гарвардского университета и Массачусетского технологического института (США). Основные события в создании этой системы редактирования геномов относятся к последним десятилетиям (табл. 3). В 2011 г. журнал «Nature Methods» назвал технологию геномного редактирования TALEN методом года, а в 2015 г. «прорывом года» стала технология CRISPR/Cas9. Доставка конструкций, экспрессирующих компоненты системы CRISPR/Cas9 в клетки, может быть выполнена следующим образом: 1. Для трансформации клеточных культур человека, мыши и других организмов чаще используют плазмиды, обеспечивающие активную продукцию нуклеазы Cas9 и sgRNA (гидовой РНК) in vitro. 2. В случае трансформации целого организма разработан метод, основанный на микроинъекции мРНК Сas9 и гидовой РНК в одноклеточные эмбрионы. Этот метод активно применяют у мышей, полосатого данио (Danio rerio) и дрозофилы. 3. Для широкомасштабного, охватывающего геном нокаута с использованием больших библиотек гидовой РНК, используют лентивирусные векторы. 4. У растений, клетки которых имеют плотную клеточную стенку, широко применяется метод плазмидной трансформации протопласта в клеточных культурах, а также агроинфильтрация при помощи бактерии Agrobacterium tumefacients. 79