Разработка молекулярно-биологических методов клонирования генов открыла новые подходы к проблеме организатора. В 1991 г. был клонирован первый специфический ген организатора – goosecoid. Расшифровка нуклеотидной последовательности этого гена обнаружила в его составе гомеобокс, наличие которого указывало на то, что gsc кодирует какой-то транскрипционный факс тор. Инъекция иРНК в вентральную область зародыша, подобно трансплантации материала организатора вызывала развитие вторичного зародыша. Несколько позже были открыты ещё несколько генов с аналогичным действием. Выяснилось, что все они являются регуляторными и кодируют транскрипционные факторы, под контролем которых находятся разнообразные гены, в том числе гены секретируемых белков. Именно секретируемые белки определяют способность хордомезодермы выступать в качестве индуктора. Сравнительно-эмбриологический анализ показал, что специфический для индуктора ген goosecoid экспрессируется не только у амфибий, но также на стадии гаструляции у рыб, птиц и млекопитающих. Регуляторные гены, активность которых обнаружена в области организатора, находятся в определенном соподчинении. Например, goosecoid включается позднее гена bozozok, так что при мутации bozozok экспрессия gsc подавляется. Дифференциальный скрининг библиотеки кДНК организатора шпорцевой лягушки, как сказано выше, позволил выделить ещё одну группу генов, активных в этой области зародыша. Оказалось, что более десятка генов, которые экспрессируются в области организатора, контролируют синтез белков, предназначенных «на экспорт», молекулы которых служат факторами дорсализации. Они поддерживают дифференциацию хордомезодермального зачатка и, вместе с тем, служат необходимым условием нейрализации прилегающей эктодермы. Выяснилось, что специфичность этого влияния определяется не только природой сигнальных молекул организатора, но не в малой степени – свойствами реагирующей ткани. Замечательная особенность этих секретируемых белков организатора состоит в том, что все они являются ингибиторами. Судя по всему, принципиальная схема взаимоотношений между тканями в области организатора характерна для всех позвоночных. Исследования, выполненные на зародышах Danio rerio, выявили мутантов, у которых не развивались дорсальные структуры, в частности, не происходила нейрализация. Наиболее сильная вентрализация зародыша наблюдалась при мутации гена chordino, гомолога гена chordin ксенопуса. Напротив, при мутации swirl, которая затрагивает белок ВМР2, отмечалась дорсализация зародыша. Такой же эффект имела мутация mini-fin, нарушающая нормальную функцию гомолога tolloid/xolloid: отсутствие нормальной металлопротеазы вызывало полную разбалансировку механизма формирования дорсо-вентральной оси зародыша. Согласно современным данным, наблюдаемая в области организатора нейрализация эктодермы осуществляется по принципу «ингибирования ингибитора»: подавляя активность молекул BMP и Wnt, организатор создает непреодолимые препятствия для дифференциации производных всех трёх зародышевых листков в направлении формирования вентральных структур (рис. 122). 163