Этот раздел систематики (хемотаксономия) оказался одним из самых эффективных в последнее время, во-первых, в силу достаточной репрезентативности его данных, во-вторых, благодаря сравнительно простой и доступной процедуре выполнения соответствующих экспериментов. Хемотаксономия сыграла исключительно плодотворную роль в систематике актинобактерий (актиномицетов) и многих других грамположительных бактерий: молочнокислых, микрококков, стафилококков [Wang, Jiang, 2016]. Своим успехом она обязана простым и быстрым количественным и качественным анализам состава клеточной стенки и липидов организмов. Одним из преимуществ хемотаксономических методов является то, что при их исполнении не требуется углублённое и обычно длительное изучение специфических особенностей развития организмов, их жизненных циклов. Специалист в данном случае может ограничиться знанием условий получения биомассы, необходимые количества которой очень незначительны. Надо помнить: клеточную биомассу собирают в конце логарифмической или в начале стационарной фазы роста. Для выявления химических маркеров применяют: (1) тонкослойную хроматографию (ТСХ); (2) газовую хроматографию (ГХ); (3) жидкостную хроматографию высокого разрешения (ВЭЖХ); (4) ЯМР спектрометрию. Рассмотрим некоторые хемотаксономические признаки. Выявление различия между грамотрицательными и грамположительными бактериями проводят в первую очередь для того, чтобы регулировать последующие этапы характеристики и идентификации исследуемых штаммов. Определение состава клеточной стенки традиционно считается важным для грамположительных бактерий. При этом анализируются тип пептидогликана и тейхоевые кислоты. Структура пептидогликана Тип пептидогликана в клеточной стенке – стабильная дифференцирующая характеристика бактерий, относящаяся к категории “качественных”. Пептидогликан (муреин) представляет собой сложный гетерополимер, обеспечивающий прочность клеточной стенки и состоящий из полисахаридных цепей, в которых 220 бактерий (например, Serratia marcescens) готовят препараты фиксированных клеток и применяют простое окрашивание. Клетки мелких бактерий, имеющих выросты в виде стебельков – простеки (представители почвенных уникальных бактерий родов Caulobacter, Stella, Labrys), целесообразнее исследовать методом фазового контраста. При идентификации природных изолятов очень важно знание природного источника и условий, в которых штамм был первоначально выделен. Это помогает ограничить круг родов, к которым мог бы относиться новый изолят. Эта информация, а также данные по морфологии, результаты окраски клеток по Граму позволяют исследователю значительно сузить область поиска до небольшой группы родов. Например, грамположительная, подвижная, спорообразующая палочка, выделенная из почвы путём аэробной инкубации на неизбирательной среде, почти наверняка будет принадлежать к роду Bacillus, и нет необходимости применять тесты для дифференциации этого организма от грамотрицательных палочек, облигатных анаэробов, грамположительных кокков и т.д. Применение морфологических признаков бактерий в значительной степени ограничивается их изменчивостью (вариабельностью). Данные признаки существенно зависят от среды, возраста, условий культивирования микроорганизмов. Тем не менее первым шагом в идентификации бактерий является тщательное морфологическое исследование свежеизолированных микробных культур. Для видовой дифференциации бактерий используются культуральные (макроморфологические) признаки: это особенности роста микроорганизмов на плотных и жидких питательных средах, формы колоний на плотных питательных средах, образование пигмента. На плотных питательных средах микроорганизмы растут в виде колонии, штриха или сплошного газона. Колония – это изолированное скопление клеток одного вида, выросшее в большинстве случаев из одной клетки. В зависимости от того, как развивались клетки (на поверхности плотной среды, в толще ее или на дне сосуда), различают поверхностные, глубинные и донные колонии. Колонии, выросшие на поверхности, 213